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有了体外蛋白表达技术,蛋白表达不出来或没有活性不再是问题

发布时间:2021-12-13      点击次数:364
   myTXTL是一种简单快速的体外蛋白表达系统,可以解决在大肠杆菌蛋白表达实验中,我们经常会遇到的蛋白表达不出来、表达出的蛋白没有活性、蛋白表达过程中容易形成包涵体等情况。

  在大肠杆菌蛋白表达实验中,我们经常会遇到蛋白表达不出来、表达出的蛋白没有活性、蛋白表达过程中容易形成包涵体等情况,还要分析出现这些情况的原因。
  1、目的蛋白不适合在大肠杆菌中表达。包括稀有密码子、mRNA结构、跨膜区等;
  2、表达条件需要进一步优化。比如温度、分子伴侣、适合的表达宿主等;
  3、采用哪种温和复性条件可以提高蛋白活性,减少包涵体的形成等等。
  除此之外,几乎每出一点差错就需要重新开始实验,表达载体的构建、感受态细胞的转化、阳性克隆的鉴定、培养基的配制、小量诱导摸条件、大量诱导、离心富集细胞、超声裂解细胞、亲和富集与纯化。又需要额外花费一周或几周,有的更甚至需要半年的时间,时间成本高到让人心烦不已。
 
  现在有一个新技术:myTXTL无细胞体外蛋白表达技术,这个技术可以替代原核细胞大肠杆菌表达系统,可以解决蛋白表达不出来、表达的蛋白没有活性、原核蛋白表达产物有包涵体的问题。
  除此之外,这个技术能够应用于可溶蛋白和膜蛋白表达、蛋白质功能鉴定、高通量筛选、分子间互作分析。还适用于在大肠杆菌中难以表达的蛋白质、蛋白质分子定向进化、噬菌体生产、基因调控网络构建、基础研究(比如,CRISPR系统鉴定)、蛋白-蛋白互作、蛋白-核酸互作、蛋白与小分子的相互作用、酶活检测等。

体外蛋白表达

 

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