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FISH探针技术作为非放射性检查系统,有着显著优势

发布时间:2022-01-22      点击次数:701
   FISH探针的基本原理是用特殊的核苷酸分子标记DNA(或RNA)探针,使探针直接与染色体或DNA纤维切片杂交,使与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合,从而实现染色体或DNA纤维切片
  FISH探针具有安全、快速、灵敏度高、探头长期保存、可同时显示多种颜色等优点,不仅可显示中期分裂相,还可显示间期核。
  FISH探针技术作为非放射性检查系统,具有以下优势:
  1、荧光试剂和探针经济、安全;
  2、探头稳定,标记一次后,2年内即可使用;
  3、实验周期短,快速获得结果,特异性好,定位准确;
  4、FISH可定位长1kb的DNA序列,其灵敏度与放射性探针相当;
  5、多色FISH在同一个核上显示不同的颜色可以同时检测多个序列;
  6、载玻片可以显示中期染色体数目和结构的变化,混悬液中也可以显示间隔性染色体DNA的结构。FISH使用的探针序列来源于基因组或细菌人工染色体(BAC)DNA,包含许多重复序列。一系列重复序列,例如着丝粒中存在的卫星DNA;分散在类似于Alu家族的迭代序列中。
  探针中的这些重复序列在与基因组杂交时容易产生非特异性信号,成为探针制备过程中的难题。人Cot-1DNA是杂交中常用的关闭和清除重复序列的工具之一。制备探针前,可用人Cot-1DNA筛选重复序列,得到特异性模板制备探针。然而,由于人Cot-1DNA只包含目标片段中部分重复序列,用Cot-1DNA去除特异性信号并不有效。
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