让细胞活泼的六大小诀窍
更新时间:2023-06-15 点击次数:1118
1.保证所有实验室材料都无菌
穿插污染是细胞培育的大敌。即使是轻微的污染,也或许毁了几个星期的效果,因培育箱内温暖湿润,真菌极易成长,因而有必要注意定时清洁。
此外,在将培育瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,运用酒精擦拭干净,以防止污染。
2.选择上佳的培育基开发策略
在细胞培育进程中,培育基是操控产品质量、产量和本钱的重要要素。有必要针对每种培育物来定制培育基,以优化实验成果,在决定以哪种方法来开发您的培育基时,您需要考虑时间和本钱等要素。
3.在传代之前不要让细胞集合
集合度是指贴壁细胞占有培育瓶表面积的份额。集合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖,一定要防止这种状况,由于它意味着细胞不能继续成长。不过,燃眉之急是运用活泼成长的细胞。
4.运用对数成长期的细胞
细胞培育进程共有3个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞成长、高细胞成长和无细胞成长,有生机的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以70-80%的集合度存在。
5.在运用前正确解冻细胞
尽管解冻看起来是个简略的步骤,但有必要操作得当,防止损伤细胞。长期暴露在高温条件下会使细胞无法铺板,因而,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培育基稀释,以防止DMSO造成直接损伤。
6.小心处理您的培育物
细胞培育的脆弱性怎样强调也不为过。剧烈摇晃,或接连的温度波动或许会对成长发生不利的影响。保证培育箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。
此外,尽量防止一次处理多个细胞系,由于它或许会影响细胞的基因型和表型。