Qubit检测管是分子生物学实验中用于核酸/蛋白质定量分析的核心耗材,其性能稳定性直接影响检测结果的准确性。不当的存储与维护可能导致检测管失效、信号漂移或背景噪声增加。本文从存储条件、操作规范、维护技巧等方面,提供延长Qubit检测管寿命的实用指南。
一、存储条件:环境控制是基础
温度管理
推荐范围:2-8°C(冷藏),避免反复冻融。
原因:Qubit检测管中的荧光染料(如dsDNA HS试剂中的染料)对温度敏感,高温或冻融可能导致染料降解或聚集,影响荧光信号强度。
案例:某实验室将检测管长期置于室温(25°C),3个月后发现信号值下降15%,更换冷藏存储后恢复正常。
湿度与光照控制
防潮:检测管需密封存放于干燥环境中,避免吸湿导致管壁结雾或染料稀释。
避光:荧光染料对紫外线敏感,长期暴露可能引发光降解。建议使用原包装避光盒或深色容器存放。
对比实验:同一批次检测管分两组,一组避光冷藏,另一组暴露于室内光照。1个月后,光照组背景荧光值增加30%,而避光组无显著变化。
防污染与防物理损伤
独立包装:未使用的检测管应保留原包装,避免与其他试剂或污染物接触。
避免碰撞:检测管为薄壁玻璃材质,运输或存储时需防止挤压、摔落,否则可能导致管壁破裂或光学区划痕。
二、使用规范:操作细节决定成败
加样前准备
平衡至室温:从冷藏取出后,需在室温(15-25°C)静置30分钟,避免冷凝水影响检测。
检查外观:使用前检查检测管是否破损、划痕或污染,异常管需丢弃。
加样与混匀
精准加样:使用微量移液器时,避免枪头触碰管壁或光学区(管底透明部分),防止划痕或残留物干扰荧光信号。
轻柔混匀:加样后上下颠倒混匀5次,避免剧烈震荡导致染料聚集或气泡产生。
孵育与检测
严格控时:孵育时间需严格按照试剂说明书(如dsDNA HS试剂孵育2分钟),过长或过短均可能导致信号偏差。
避免污染:孵育期间需盖紧管盖,防止蒸发或交叉污染。
三、维护技巧:延长耗材寿命的进阶策略
清洁与去污
残留物处理:若检测管内壁残留样本或染料,可用无尘纸蘸取70%乙醇轻轻擦拭,避免刮伤光学区。
去蛋白:对于蛋白质污染,可使用含尿素或SDS的清洗液浸泡后冲洗,但需彻底干燥后再使用。
定期校准与验证
标准品检测:每月使用已知浓度的标准品(如Qubit校准品)验证检测管性能,确保信号值在预期范围内。
背景值监测:记录空白检测管的背景荧光值,若显著升高(如超过初始值的20%),需排查存储条件或更换批次。
库存管理
先进先出:按生产日期或批号使用检测管,避免过期。
批次一致性:同一实验尽量使用同一批次检测管,减少批次间差异导致的误差。
四、常见问题与解决方案
Qubit检测管的寿命与性能受存储环境、操作规范和维护技巧的共同影响。通过以下措施可显著延长耗材寿命:五、总结
冷藏避光存储,避免温度波动与光照降解;
规范操作,减少人为污染与物理损伤;
定期验证,确保检测管性能稳定。
科学合理的存储与维护不仅能降低实验成本,更能保障定量结果的准确性,为分子生物学研究提供可靠支持。