一、myTXTL T7 Expression Kit/myTXTL Linear DNA Expression Kit产品特点:
(1)通用性:兼容T7表达系统;
(2)使用方便:仅需标准的实验室设备;
(3)高通量:一次实验可对多个样品进行操作;
(4)可靠:基于大肠杆菌提取物的蛋白表达系统;
(5)快速:不需要转化、克隆筛选或者进行细胞裂解;
(6)即用型:即时即用的预混液,仅需将DNA加入表达系统;
(7)高效率:目标蛋白在数小时内表达出来;
二、myTXTL T7 Expression Kit/myTXTL Linear DNA Expression Kit产品应用
1、蛋白表达
(1)可溶蛋白和膜蛋白表达
(2)蛋白质功能鉴定
(3)高通量筛选
(4)分子间互作分析
(5)适用于难以表达蛋白质
(6)体外蛋白质分子定向进化
2、合成生物学
(1)噬菌体生产
(2)基因调控网络构建
(3)基础研究(比如,CRISPR系统鉴定)
三、Linear DNA Expression Kit
以线性DNA为模板的无细胞蛋白质合成体系。具有高效表达可溶蛋白和膜蛋白的能力,不需要添加额外的稳定剂。
四、常见问题
1、来源于真核细胞的基因,如果没有针对大肠杆菌进行密码子优化,能否在myTXTL® Sigma 70 Master Mix中进行蛋白表达?
myTXTL? Sigma 70 Master Mix 含有大肠杆菌缺乏的7种密码子,能够防止翻译的提前终止。
2、哪些种类的质粒适用于myTXTL?Sigma 70 Master Mix?
myTXTL® 依赖于E. coli内源的转录和翻译机制,使用大肠杆菌RNA聚合酶与σ70因子。基因可以构建在P70启动子的下游。常用的原核表达载体,例如pGEX-4T-1含有Tac启动子,可直接用于myTXTL? Sigma 70 Master Mix。pET-28a(+)和pET-48b(+)含有T7启动子,仅仅需要添加P70a-T7rnap辅助质粒,用于表达T7 RNA聚合酶。