1. 荧光信号异常(过高或过低)
原因:
检测管未完全避光,导致荧光淬灭或背景信号干扰。
样本或试剂中存在杂质(如蛋白质、盐类),影响荧光结合效率。
检测管材质不匹配(如非官方推荐品牌),荧光透过率低。
解决方案:
确保检测管存储于避光环境,操作时避免强光直射。
离心样本去除杂质,或使用高纯度试剂。
优先选择官方认证的Qubit检测管(如Thermo Fisher Scientific或翌圣生物产品)。
2. 背景值过高
原因:
检测管未清洁干净,残留荧光物质。
试剂或样本污染(如重复使用检测管)。
仪器未校准或存在光学污染。
解决方案:
使用前用70%乙醇擦拭检测管,避免重复使用。
定期校准Qubit仪器,清理检测槽。
若背景值持续异常,联系技术支持排查仪器故障。
3. 检测结果重复性差
原因:
检测管加样体积不准确(如移液器误差)。
样本或试剂未充分混匀,导致浓度梯度。
检测管壁吸附样本,影响实际检测量。
解决方案:
使用校准后的移液器,确保加样体积一致。
样本与试剂混合后涡旋震荡3-5秒,静置后离心去除气泡。
选择低吸附性的检测管(如翌圣生物Qubit专用检测管,CV值<10%)。
4. 检测管破裂或漏液
原因:
操作不当(如过度挤压或跌落)。
检测管质量缺陷(如管壁过薄)。
低温环境下检测管变脆。
解决方案:
轻拿轻放检测管,避免剧烈震荡。
选择质量可靠的检测管品牌,检查包装是否完好。
若需低温保存,提前将检测管恢复至室温再使用。
5. 检测管与仪器不兼容
原因:
使用了非官方推荐的检测管型号。
检测管尺寸或材质不符合仪器要求(如厚度、透光率)。
解决方案:
参考Qubit仪器说明书,选择适配的检测管(如0.2 mL或0.5 mL规格)。
避免使用非透明或高自发荧光的检测管。
若需批量检测,优先选择兼容酶标仪的检测管(如翌圣生物离心管开盖器搭配使用)。
6. 检测管内样本凝固或结晶
原因:
样本保存温度不当(如DMSO试剂需室温保存)。
检测管内样本长时间暴露于低温环境。
解决方案:
严格按照试剂说明书保存样本和试剂。
检测前将样本恢复至室温,避免反复冻融。
总结建议
定期校准:确保Qubit仪器和检测管处于最佳状态。
优化操作:遵循标准流程,减少人为误差。
选择优质耗材:使用官方认证或高兼容性的检测管(如翌圣生物Qubit专用检测管,R²>0.99)。
通过以上措施,可显著提高Qubit检测的准确性和重复性。